3. Discutir os métodos de eluição por gradiente e isocrática:
Discuss methods for gradient elution and isocratic
Para ilustra nossa discussão, selecionamos um separação cromatográfica encontrada na bibliografia 3, onde temos uma separação por gradiente e outra isocrática. O modo de análise isocrática consiste em analisar uma amostra em que a fase móvel permanece em proporção constante durante toda a análise. O modo de eluição por gradiente consiste em uma modificação programada da proporção dos reagentes da fase móvel.
Podemos perceber que a ordem de eluição dos componentes permanece a mesma, porém a intensidade dos picos variou muito, temos que na análise por gradiente a maior intensidade de pico foi do pentaclorobenzeno já por análise isocrática foi do monoclorobezeno. Outro fator interessante é a proximidade dos picos gerando uma análise mais rápida pro gradiente.
Modo Tempo Proximidade entre os picos Resolução:
Gradiente Menor, devido a mudança da polaridade da fase móvel que assim gera uma rapidez na eluição de compostos de diferentes polaridades.
Mais próximos devido a tempo de eluição ser menor pela mudança de polaridade, isso pode ser uma vantagem pelo quesito tempo, mas também uma desvantagem devido à proximidade pode ocorrer sobreposições de picos.
Resolução satisfatória, porém os picos estavam razoavelmente próximos o que poderia geral uma possível sobreposição que no caso acima não ocorreu.
Isocrática Maior, devido a constante polaridade da fase móvel que assim gera uma maior tempo de eluição para composto de diferentes polaridades.
A proximidade entre os picos varia de próximos a distantes, com isso podemos determinar a polaridade dos compostos.
Resolução de qualidade ruim em relação aos últimos picos que apresentam caudas laterais.
A análise pelo modo de eluição por gradiente é mais conveniente devido sua rapidez e sua resolução, porém a análise isocrática é indicada para análise o compostos específicos.
A separação por cromatografia líquida de alta eficiência, proporção uma separação razoavelmente boa, porém esse equipamento é de custo elevado dependendo do tipo de coluna empregada e do detector. O trabalho sendo realizado em uma amostra real no caso de chá foi muito interessante devido a complexidade da amostra, e as perspectivas que obtivemos sobre o chá preto nas quais contribuem para a saúde e a qualidade de vida de pessoas com doenças crônicas.
Fonte: Cromatografia Líquida de Alta Eficiência - Disponível em:< http://www.ebah.com.br/content/ABAAAeqmMAH/clae-cromatografia-liquida-alta-eficiencia>. Acesso em: 5 maio 2014.
Postado por: Sterffson Jota
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